DNA Polymerase I, E. coli

アプリケーション

• ニックトランスレーションにより標識DNAプローブを調製¹。
• Second-strand cDNA合成²。
• In Vitro DNA合成

大腸菌由来DNA Polymerase IはDNA依存性DNAポリメラーゼです。この酵素にはさらに5’→3’および3’→5’エキソヌクレアーゼ活性を持っています³。5’→3’エキソヌクレアーゼ活性があるため、この酵素はDNA中に存在するニックやギャップをニックトランスレーションによるDNA標識化の出発点として利用することができます。

ユニットの定義：標準的な条件下、37℃で30分間に10 nmolのdNTPを酸不溶物に変換するDNA Polymerase I, E. coliを1単位とする。

保存バッファー：50 mM Tris-HCl (pH7.5)、0.1M NaCl、0.1 mM EDTA、1 mM DTT、0.1% Triton^® X-100を含む50%グリセロール溶液

品質管理：Polymerase I, E. coli は、検出可能なエンドヌクレアーゼ活性及びRNase活性のコンタミがないことを確認しています。

参考文献

1. Meinkoth, J. and Wahl, G.M. (1987) Meth. Enzymol. 152, 91.
2. Gubler, U. and Hoffmann, B.J. (1983) Nucleic Acids Res. 16, 1999.
3. Lehman, I.R. (1981) The Enzymes 14, 16.

プロトコール

DNA Polymerase I, E. Coli

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