ExtractMaster™ Fecal DNA Extraction Kit

アプリケーション

糞便サンプルからPCRにそのまま使用できるDNAを抽出し、様々な生理学的・病理学的研究

ExtractMaster™ Fecal DNA Extraction Kitには、糞便からPCRにそのまま使用可能なDNAを回収するために必要な試薬がすべて付属しています。界面活性剤溶解処理と簡単なクロマトグラフ処理をおこなうことで、糞便サンプルからDNAと共抽出する低分子阻害剤を除去します。回収されたDNAはPCRにそのまま使用でき、FailSafe PCR Systemでバクテリア、原生生物、動物のテンプレートの増幅に使用できます（Fig.1）。

ExtractMaster™ Fecal DNA Extraction Kitは、DNAをヒト（Fig.2）、ラット、鳥類、ネコ、およびウシなどの様々な動物より採取した少量の糞便から50分以内にPCRにそのまま使用可能なDNAを抽出できるようにデザインされています。

糞便サンプルから回収されたDNAからは、動物の病態生理学的情報が得られます。たとえば、糞便から採取したDNAのメチル化パターンの変化は、ヒトの結腸直腸癌スクリーニングにおける有望なマーカーとなると考えられています。地方の分水界では、大腸菌タイピングが動物の糞便による水質汚染の原因動物を追跡するのに役立つ可能性があります。さらに、野鳥やヒトの腸管寄生原虫の検出やヒトの倍オーム研究にもPCRを利用できます。

利点

手順はやさしく簡単です
有毒な有機溶剤を使用しません
最終的なDNAは少量の溶液中に回収されるため、その後の分析が実施しやすくなります

Fig.1　ExtractMaster™ Fecal DNA Extraction Kitを用いて抽出したDNAのPCR分析結果

真正細菌rRNA遺伝子のプライマーを用いて、糞便中の微生物相をPCRにより検出しました。反応サイクルは96℃で3分間反応させた後で、96℃で30秒間、57℃で30秒間、72℃で45秒間の反応を28サイクル実施しました。 Lane M : 100bpDNAマーカー、Lane 1 : ヒト糞便DNA、Lane 2 : ラット糞便DNA、Lane 3 : オンドリ糞便DNA、Lane4 : No-template アンプリコンサイズは350bpです

Fig.2　乳児の糞便サンプル中に存在するロタウィルスのRT-PCRによる同定

ExtractMaster Kitを用いてロタウィルスのdsRNAを抽出しました。全ての核酸は、RT-PCRのテンプレートに使用されました。 Lane M : 100bpDNAマーカー、Lane 1及び3 : フェノール/クロロフォルム抽出で回収された核酸からのRT-PCR産物、Lane2及び4 : ExtractMaster Kitを用いて回収された核酸からのRT-PCR産物 Lane3及び5で確認された1,062bpのアンプリコンは完全長のvp7 RNAに対応しており、ロタウィルス陽性であることが示されています

製品名	Cat No.	容量
ExtractMaster™ Fecal DNA Extraction Kit	FD05005	5 Purifications
	FD05025	25 Purifications
Contents: Fecal DNA Extraction Buffer, Proteinase K, Fecal Lysis Buffer, Protein Precipitation Reagent, DNA Precipitation Solution, Pellet Wash Solution, TE Buffer, Inhibitor Removal Resin, Spin Columns.

プロトコール
Citation

1. Randall, L., et al. (2010) Development and evaluation of internal amplification controls for use in a real-time duplex PCR assay for detection of Campylobacter coli and Campylobacter jejuni, J. Med. Microbiol. 59 , 172-178.

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