MasterPure™ DNA Purification Kit for Blood Version �U

アプリケーション

ゲノムDNAを全血または場フィーコートから精製し、様々な分子生物学的アプリケーションに

MasterPure™ DNA Purification Kit for Blood Version IIは全血または場フィーコートからきわめて純度の高いゲノムDNAを抽出するキットです。プロトコールはDNA用に最適化されているため、600μLのバフィーコートから最大で100μgのDNAを30分以内に回収できます（Table. 1）。精製DNAには低分子量および高分子量のゲノムDNAが含まれており、PCR増幅反応のテンプレートとして（Fig.1）､または制限酵素処理（Fig.2）やサザンブロッティングなどの分子生物学的アプリケーションにそのまま使用できます。ゲノムDNAとTNAについては、全血およびバフィーコートから精製するためのプロトコールが添付されています。RNAサンプルについては、MasterPure RNA Purification Kit の使用を推奨します。いずれのプロトコールも、スケールアップによって大規模なサンプルに対応できます。

利点

• 325μLの全血から最大で10μgのDNA、600μLのバフィーコートから約100μgのDNAを安定的に回収可能です
• A₂₆₀/A₂₈₀ 比は常に1.8〜2.0となります
• プロトコールは30分以内に完了します
• 回収率低下の原因となるカラムは使用しません
• 有機溶媒は使用しません
• 精製DNAはPCRにそのまま使用することも保存することもできます
• プロトコールはスケール変更が可能で、大規模または小規模のサンプルに対応できます

Table.1　MasterPure™ DNA Purification Kit for Blood Version �UによるDNA回収率

Fig.1　血液から精製されたDNAの効率的なマルチプレックスPCR

MasterPure™ DNA Purification Kit for Blood Version IIを用いて精製したヒトゲノムDNAの100ngを、TAQXpedite PCR Systemとジストロフィン遺伝子の様々なエクソンに対応する9種類のプライマーセットを使用して増幅しました。血液DNA増幅反応を3回実施したところ、9種類全てのアンプリコンが確認されました。

Fig.2　MasterPure™ DNA Purification Kit for Blood Version IIを用いて凍結全血から精製したヒトゲノムDNAの効率的な制限エンドヌクレアーゼ処理

精製DNAの1μgを各制限エンドヌクレアーゼで2時間処理しました
Lane M :kb marker Lane 1 : Bgl II、
Lane 2 : EcoR I、 Lane 3 : Hae III、
Lane 4 : Hind III、Lane 5 : Pvu II、
Lane 6 : Rsa I、 Lane 7 : Xba I

プロトコール

MasterPure™ DNA Purification Kit for Blood Version �U

• BuccalAmp DNA Extraction Kit
• QuickExtract™ DNA Extraction Solution
• Catch-All Sample Collection Swab
• FailSafe PCR System
• TAQXpedite PCR System (FAST End-Point)
• MasterPure™ DNA and RNA Purification Kit