Pvu Rts1I Endonuclease

アプリケーション

• 5-mCから5-hmCの区別
• グルコシル化と非グルコシル化5-hmCにおけるDNAの切断

Pvu Rts1Iは、5-hydroxymethylcytosines (5-hmC)を含む二本鎖DNAを切断するエンドヌクレアーゼです¹ 。通常の切断条件のもとで酵素は、1つ鎖もしくは両方の鎖における修飾塩基を含むDNAを選択的に切断します。Pvu Rts1Iの共通の切断サイトは、5-hmCN_11-12/N_9-10Gです。² Pvu Rts1Iは、ゲノム内における5-hmCパターンを分析するためのツールとして優れています。さらにds DNAにおける5-mCと5-hmCを区別するので、グリコシル化および非グリコリル化 5-hmC dsDNAの両方を切断できます。

酵素は、100-unitサイズ（濃度1 U/μl）で提供しています。10X Reaction Bufferが付属します。

保存: -20°C

Storage Buffer: 50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 M NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, and 0.1% Triton® X-100を含む50% glycerol

Unit Definition: One unit is the amount of Pvu Rts1I needed for complete digestion of 1 μg of T2 gt- DNA in 60 minutes at 30°C in 1X Reaction Buffer, in a 50-μl reaction.

Pvu Rts1I 10X Reaction Buffer: 330 mM Tris-acetate (pH 7.5), 660 mM potassium acetate, 100 mM magnesium acetate, and 5 mM DTT.

Contaminating Activity Assays: Pvu Rts1Iは、検出できる非特異的なエクソヌクレアーゼ活性、エンドヌクレアーゼ活性およびRNase活性がないことを確認しています。

References

1. Janosi, L. et al., (1994) J. Mol. Biol. 242, 45.
2. Szwagierczak, A. et al., (2011) Nucleic Acids Res. Doi:10.1093/nar/gkr118.

プロトコール

Pvu Rts1I Endonuclease

• T4 Beta-glucosyltransferase　

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