T7, T3, and SP6 RNA Polymerases

T7、T3及びSP6 RNAポリメラーゼは、各RNAポリメラーゼプロモーターの下流の２本鎖DNAからin vitro transcriptionにより特異的なRNAを合成します。

Applications

• 合成されたRNAは、hybridization probe、anti-sense RNA、ribozyme、in vitro翻訳のためのテンプレートとして、またスプライシングや他のプロセス研究のためのmRNAの前駆体に使用でき、もしくはRNAiやgene silencingのためのdsRNAを作製するために資料できます。
• 核酸増幅法、遺伝子発現解析の為のRNA合成

Benefits

• 高純度かつ高活性
• 50 U/μlから2,500 U/μlの幅広い濃度で提供

Notes

5X Transcription BufferとDTTを含むbuffer packageは別売です。

Unit Definition

One unit of phage RNA polymerase catalyzes the incorporation of 1 nmole of a labeled ribonucleoside triphosphate into RNA in 1 hour at 37℃ in 40 mM Tris-HCl (pH 7.5), 6 mM MgCl2, 10 mM NaCl, 2 mM spermidine, 10 mM DTT, and 0.5 mM each NTP using a DNA template with the appropriate T7, SP6, or T3 promoter.

Storage Buffer

50% glycerol containing 50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 M NaCl, 1.0 mM DTT, 0.1 mM EDTA, and 0.1% Triton X-100.

5X Transcription Buffer (available separately)

0.2 M Tris-HCl (pH 7.5), 50 mM NaCl, 30 mM MgCl2, and 10 mM spermidine.

Quality Control

The phage RNA polymerases are tested in in vitro transcription reactions, and are free of detectable exo- and endonuclease and RNase activities, and E. coli RNA polymerase activity.

General References

T7 RNA Polymerase

1. Davanloo, P. et al. (1984) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81, 2035.
2. Eberwine, J. (1992) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89, 3010. (Use of T7 RNA Polymerase for this application may require a license.)
3. Stahl, S. and Zinn, K. (1981) J. Mol. Biol. 148, 485.

T3 RNA Polymerase

1. Konarska, M.M. et al. (1984) Cell 38, 731.
2. Parvin, J.D. et al. (1986) DNA 5, 167.

SP6 RNA Polymerase

1. Butler, E.T. and Chamberlin, M.J. (1982) J. Biol. Chem. 257, 5772.
2. Melton, D.A. et al. (1984) Nucl. Acids Res. 12, 7035.

(Enzyme only. Transcription Buffer is not included.)

Includes 5 ml of 5X Transcription Buffer and 2.5 ml of 100 mM DTT.

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